猪圆环病毒和大肠杆菌混合感染的诊断
发布时间:2017-02-23 来源:猪业科学
猪圆环病毒病是由猪圆环病毒引起的猪一种新的传染病,其临床诊断表现多种多样,会造成免疫力降低,主要特征为体质下降、腹泻及内脏器官等广泛病理变化[,特别是肾脏、脾脏及全身淋巴结高度肿大、出血和坏死等。猪大肠杆菌病是由病源性大肠杆菌引起的仔猪肠道传染性疾病,以发生肠炎、肠毒血症为特征。1~7日龄仔猪发生的一种急性、高度致死性的肠道传染病,临床以灰白色稀便为主要特征,发病率高,死亡率低。该病一般发生于个别猪群,有时整群发病,以前多见于春秋季节,但现在的流行特点是没有明显的季节性。新生仔猪24 h内最易感染发病。一般出生后3 d左右发病,最迟不超过7 d。
无菌采取病死猪的肝脏、肺脏接种于血琼脂培养基中,37 ℃培养24 h后挑取典型菌落接种于麦康凯培养基和伊红美蓝培养基37 ℃恒温培养24 h,观察菌落特征。结果为麦康凯培养基长出粉色,光滑,圆形菌落;在伊红美蓝培养基长出紫黑色,金属光泽菌落,对其进行革兰氏染色镜检,染为红色菌落,可见两端钝圆,短小杆状菌,革兰氏染色为阴性(如图4,图5和图6)。
在血平板上培养纯化的单菌落,贴药敏片于培养基进行37℃培养。结果表明该分离菌对畜炎宁、阿米卡星、头孢唑啉和头孢噻呋高度敏感;对强力霉素、庆大霉素和硫酸头孢喹肟中敏;对氟苯尼考、恩诺沙星和林可霉素耐药(表1)。
分离纯化的菌进行生化试验,过氧化氢酶、糖类发酵、硫化氢和尿素酶等试验,结果能发酵糖类,产酸、产气、不产生H2S,不分解尿素,符合大肠杆菌生化特性(表2)。
按照 TIANamp Virus DNA/RNA Kit 病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒提取病毒的DNA和RNA,用猪瘟病毒、猪蓝耳病毒、高致病性猪蓝耳病毒、圆环病毒和伪狂犬病毒的特异性引物进行PCR反应扩增。引物参照GenBank发表的基因序列设计并合成(见表3)。结果显示第4泳道在490 bp左右有一条带,与圆环病毒片段相符,见图7。综合诊断可以确诊该病例为猪圆环病毒和大肠杆菌混合感染。
1)对病猪进行隔离,无害化处理,搞好环境卫生,疫苗接种等综合防治措施,避免病原入侵。及时治疗发病猪,防止传染给其他猪。对猪舍通道设备等全面消毒,每3天消毒1次,尽量做到清除环境中潜在病原微生物,保证消毒效果。环境净化,疫情严重威胁时,在多数猪场尚无多点生产体系情况下,育肥舍要单元式全进全出的管理,每个猪舍用具、人员等要独立,不可共用。2)制定合理的免疫保健程序,改善饲养管理,合理搭配日粮,改善空气质量,降低氨气和硫化氢的浓度,减少环境带来的应激,以及避免饲喂霉变饲料等,饲料要定期添加抗生素和维生素,增强机体的免疫力。3)制定免疫程序,合理制定计划,根据当地相应感染毒株进行疫苗注射,合理定期进行抗体情况的监测,保证猪群的健康水平;减少应激因素对仔猪的影响,病猪要进行对症治疗,选用黄芪多糖等。总之,防治猪场病毒和细菌性的混合感染最主要就是做好消毒措施,并且调节动物机体的免疫功能,通过多方面的渠道最终才能达到抵抗病毒的入侵。